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實驗室細菌培養(yǎng)為什么都要用二氧化碳培養(yǎng)箱來做呢?

細胞培養(yǎng)(cell culture)技術是指選用各種細胞的最佳生存條件對活細胞進行培養(yǎng)和研究的技術,是廣泛應用于生命科學領域的重要技術。

一般細胞培養(yǎng)液的pH在7.0-7.4之間。由于碳酸鹽pH緩沖系統(tǒng)是一種生理pH緩沖系統(tǒng)(它是人體血液中重要的pH緩沖系統(tǒng)),所以大多數培養(yǎng)液用它來保持穩(wěn)定的pH。用粉末配制培養(yǎng)液時,常常需要加入一定量的碳酸氫鈉。對大多數以碳酸鹽作為pH緩沖系統(tǒng)的培養(yǎng)液而言,以為了維持穩(wěn)定的pH,培養(yǎng)箱中的二氧化碳需要維持在2-10%之間,以保持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳的濃度。同時細胞培養(yǎng)的器皿需要一定程度的透氣,以便于氣體的交換。


是不是采用其他pH緩沖系統(tǒng)就不需要二氧化碳培養(yǎng)箱了呢?人們發(fā)現由于空氣中的二氧化碳濃度很低,如果細胞不在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)液中的HCO3-會被耗盡,這樣會影響細胞的正常生長。所以大部分動物細胞的培養(yǎng),還是需要二氧化碳培養(yǎng)箱。

在過去的數十年間,細胞生物學、分子生物學、藥理學等的研究領域都有了驚人的長足進步,同時,這些領域中的技術應用也不得不跟上“腳步"。雖然典型的生命科學實驗室設備有了很大的改變,但二氧化碳培養(yǎng)箱依然是實驗室中的主要組成部分,其使用的目的都是維持和促使細胞和組織更好地生長。然而,隨著技術的進步,其功能和運作都變得越來越精確、可靠和方便。如今,二氧化碳培養(yǎng)箱已成為實驗室普遍使用的常規(guī)儀器之一,已廣泛應用于醫(yī)學、免疫學、遺傳學、微生物、農業(yè)科學、藥物學的研究和生產。

CO2培養(yǎng)箱是通過對周圍環(huán)境條件的控制制造出一個能使細胞/組織更好地生長的環(huán)境,條件控制的結果就會形成一個穩(wěn)定的條件:如恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、穩(wěn)定的溫度(37°C)、較高的相對濕度(95%)、穩(wěn)定的CO2水平(5%),這就是為什么上述領域的研究員如此熱衷于使用方便穩(wěn)定可靠的二氧化碳培養(yǎng)箱。

此外,由于增加了二氧化碳濃度控制,并且使用微控制器對培養(yǎng)箱溫度進行精確控制,使生物細胞,組織等的培養(yǎng)成功率、效率都得到改善?傊趸寂囵B(yǎng)箱是普通電熱恒溫培養(yǎng)箱不可替代的新型培養(yǎng)箱。

使用者對二氧化碳培養(yǎng)箱的選購關心的當然就是其可靠性、污染物的控制和使用方便。CO2培養(yǎng)箱主要控制模擬活體內環(huán)境相關的3個基本變量:穩(wěn)定的CO2水平、溫度、相對濕度。要有穩(wěn)定的培養(yǎng)環(huán)境,就要考慮這三方面的影響因素,選購時,就應該對這些“重中之重"有一定的了解才能選到適合自己的儀器。但是,其它的一些方面的“小"因素也不能忽略,因為這些都會影響儀器的使用價值和壽命。選購時,就應該從各方面的因素加以考慮。

溫度控制:

保持培養(yǎng)箱內恒定的溫度是維持細胞健康生長的重要因素。當選購二氧化碳培養(yǎng)箱時,有兩種類型的加熱結構可供選擇:氣套式加熱和水套式加熱。雖然這兩種加熱系統(tǒng)都是精確和可靠的,但是它們都有著各自的優(yōu)點和缺點。水套式培養(yǎng)箱是通過一個獨立的熱水間隔間包圍內部的箱體來維持溫度恒定的。熱水通過自然對流在箱體內循環(huán)流動,熱量通過輻射傳遞到箱體內部從而保持了溫度的恒定。獨特的水套式設計有其優(yōu)點:水是一種很好的絕熱物質,當遇到斷電的時候,水套式系統(tǒng)就能更可靠地長久保持培養(yǎng)箱內的溫度準確性和穩(wěn)定性(維持溫度恒定的時間是氣套式系統(tǒng)的4-5倍)。如果您的實驗環(huán)境不太穩(wěn)定(如有用電限制,或者經常停電)并需要保持長時間穩(wěn)定的培養(yǎng)條件,此時,水套式設計的二氧化碳培養(yǎng)箱就是您較好的選擇。而氣套式加熱系統(tǒng)是通過箱體內的加熱器直接對箱內氣體進行加熱的。氣套式設計在箱門頻繁開關引起的溫度經常性改變的情況下能夠迅速恢復箱體內的溫度穩(wěn)定。因此,氣套式與水套式相比,具有加熱快,溫度的恢復比水套式培養(yǎng)箱迅速的特點,特別有利于短期培養(yǎng)以及需要箱門頻繁開關的培養(yǎng)。此外,對于使用者來說氣套式設計比水套式更簡單化(水套式需要對水箱進行加水、清空和清洗,并要經常監(jiān)控水箱運作的情況)。在購買氣套式培養(yǎng)箱時,要注意的是:為了不影響培養(yǎng),培養(yǎng)箱還應該有一個風扇以保證箱內空氣的流通和循環(huán),此裝置還有助于箱內溫度、CO2和相對濕度的迅速恢復。

此外,有些類型的二氧化碳培養(yǎng)箱還具備外門及輔助加熱系統(tǒng),這個系統(tǒng)能加熱內門,提供給細胞良好的濕度環(huán)境,保證細胞滲透壓維持平衡,且可有效防止形成冷凝水以保持培養(yǎng)箱內的濕度和溫度。如果您的培養(yǎng)環(huán)境需要精確的控制,那么這個輔助系統(tǒng)則是必不可少的。


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