二氧化碳培養箱能否抑菌或滅菌是很多用戶非常關心的問題,病毒、真菌(霉菌和酵母菌)、細菌、支原體、非同種細胞是二氧化碳培養箱中主要的污染源,培養箱內的環境也同樣適合這些污染物的生存,細胞培養中大部分時間里細胞都是位于培養箱內,因此做好抑菌及滅菌的工作是很有必要的。
、污染物介紹:
1.病毒:由于病毒寄生生存,爆發后建議盡快和正常細胞隔離,丟棄處理,相對來說容易處理,盡管病毒污染的細胞不影響原代培養,但生產疫苗是不安全的。因此,潛在病毒是細胞大量生產和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。
2.真菌(霉菌和酵母菌):真菌生長的較慢,而細菌卻很容易被發現,但旦發現有它的存在說明細胞已被污染了;目前沒有好的抑制方法,包括現在常用的兩性霉素,旦污染容易反復爆發,尤其孢子很難殺滅。
3.細菌:細菌污染后,培養基1-2天就會變色,對細胞生長影響明顯,應迅速將污染細胞與其它細胞系隔離,滅菌后丟棄,還要用實驗室消毒劑消毒培養器皿和超凈臺。
4.支原體:支原體污染后,因它們不會使細胞死亡可以與細胞長期共存,培養基般不發生渾濁,細胞無明顯變化,外觀上給人以正常感覺,實則細胞已經受到多方面潛在影響,如引起細胞變形,影響DNA合成,抑制細胞生長等,往往被大多數實驗者忽視。
5.非同種細胞:即細胞交叉污染,由于細胞培養操作時各細胞株所需的器材和溶液沒有嚴格分開,往往會使種細胞被另種細胞污染。
二、二氧化碳培養箱滅菌技術介紹:
二氧化碳培養箱的滅菌技術目前主要有紫外燈照射、濕熱、消毒劑擦拭、干熱等。
1.紫外燈照射法的有效性受很多因素影響,如遮擋、時間、強度、照射距離,濕度等。
2.濕熱:通常用于高壓蒸汽滅菌中,比較少用在CO2培養箱上,濕熱滅菌在常壓下又叫煮沸法,煮沸的水溫般至少需為100℃,細菌繁殖體煮沸5分鐘被殺死,但芽胞常需煮沸2小時以上才可被殺死;
3.消毒劑擦拭法:主要適合于平整的表面如實驗臺面,而箱體內部設計的死角、各種器件因無法擦拭等因素導致滅菌效果也很有限,而且含氯、碘的消毒劑對于不銹鋼有腐蝕作用,不能對不銹鋼箱體進行擦拭滅菌。
4.高溫干熱空氣滅菌是如今世界公認的有效的滅菌技術,能徹底消滅所有微生物污染源(包括耐高溫的芽孢桿菌)。
三、二氧化碳培養箱自身抑菌設計介紹:
1.外體采用優質不銹鋼材質,外加抗菌涂層。
2.全圓弧,完全光滑的內膽結構,極大程度上減少了污染面積;易于清潔與保養。
3.內壁采用拋光不銹鋼材質,研究顯示拋光不銹鋼能夠明顯降低污染物的生長。
4.HEPA高空氣過濾器設計,能夠有效的過濾掉進氣潛在的污染源和顆粒雜質。
防污染設計和消毒滅菌系統污染是導致細胞培養失敗的個主要因素,因而,二氧化碳培養箱的制造商們設計了多種不同的裝置去減少和防止污染的發生,其主要途徑都是在盡量減少微生物可生長的區域和表面,并結合自動排除污染裝置來有效防止污染的產生。
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